Guidling Technology laat u de eenvoudige en efficiënte methode van ontzilting en concentratie leren
Eiwitten moeten vaak worden ontzout na scheiding en zuivering, en deze zouten zijn voornamelijk afkomstig van verschillende ionen in levende organismen (bijv. natriumionen, kaliumionen, chloride-ionen, enz.) evenals bufferzouten in de extracten, zouten in de eluentia en zoutcomponenten van bepaalde denaturanten die voor experimenten worden gebruikt. Een hoge zoutconcentratie kan de activiteit en stabiliteit van eiwitten beïnvloeden, evenals hun interacties met andere moleculen, waardoor interfererende signalen worden gegenereerd of de nauwkeurigheid van metingen bij daaropvolgende analytische methoden zoals elektroforese, massaspectrometrie en kristallografisch onderzoek wordt verminderd. Daarom is het zeer noodzakelijk om de gezuiverde eiwitten na scheiding te ontzouten, en de belangrijkste vaak gebruikte ontzoutingsmethoden zijn membraanchromatografie (dialyse en ultrafiltratie) en gelfiltratiechromatografie. Bovendien kan ontzilting in sommige gevallen ook door verdunning worden bereikt.
Dialyse-ontzilting, vanwege de lange cyclus en de behoefte aan een groot aantal vervangende vloeistoffen, is de toepassing ervan sterk beperkt en wordt het minder gebruikt in de industrie, maar voornamelijk gedeeltelijk gebruikt in het laboratorium. Het laboratorium wordt ook geleidelijk vervangen door ultrafiltratiebuizen /ultrafiltratiebeker.
De belangrijkste membraanscheidingstechnologie die wordt gebruikt bij het ontzouten en concentreren van eiwitten is ultrafiltratie. Ultrafiltratie is een membraanscheidingstechnologie met een hoog rendement, een laag energieverbruik, geen faseverandering, geen noodzaak om chemische reagentia toe te voegen, eenvoudige bediening, milde omstandigheden, het vermogen om de activiteit van biologische macromoleculen beter te behouden, een hoog herstelpercentage en andere voordelen , en het gebruik ervan bij eiwitscheiding en -zuivering heeft unieke voordelen.
Ultrafiltratie is een membraanfiltratiemethode die een poreus membraan als scheidingsmedium gebruikt en vertrouwt op het drukverschil tussen de twee zijden van het membraan als de drijvende kracht om stoffen met verschillende molecuulgewichten in oplossing te scheiden, waardoor ze een rol spelen bij ontzilting, concentratie en zuivering. Dit is een nieuwe methode die de afgelopen jaren is ontwikkeld en die het meest geschikt is voor de concentratie of ontzilting van biologische macromoleculen, vooral eiwitten en enzymen. De sleutel tot de toepassing van ultrafiltratie is de keuze van het membraan, verschillende typen en specificaties van het membraan, het verschil in waterstroomsnelheid, molecuulgewichtsgrens en andere parameters. Het moet worden geselecteerd op basis van de relevante werkbehoeften. Bovendien hebben de vorm van het ultrafiltratieapparaat, de samenstelling en eigenschappen van de opgeloste stof, de concentratie van de oplossing, enz. Een zekere invloed op het effect van ultrafiltratie.
De toepassing van ultrafiltratietechnologie voor het ontzouten en concentreren van eiwitten in het zuiveringsproces van eiwitten wordt gekenmerkt door de geschiktheid ervan voor de behandeling van grote hoeveelheden vloeistoffen variërend van enkele honderden tot enkele duizenden liters met de voordelen van eenvoud van bediening, tijdbesparende en een hoog eiwitherstelpercentage. De ultrafiltratiemethode is ontwikkeld uit ultrafiltratiebuizen voor verwerking van microvolumes in laboratoria, ultrafiltratiebekers voor verwerking van kleine volumes en ultrafiltratiesystemen voor industrieel gebruik.
Ultrafiltratie is onderverdeeld in directe drukultrafiltratie en tangentiële stroomfiltratie, en momenteel wordt tangentiële stroomfiltratie voornamelijk gebruikt in de industrie, die veel wordt gebruikt bij ontzilting en buffervervanging.
Het volgende is een voorbeeld van de toepassing van de ultrafiltratiemembraancassettes van Guidling Technology bij de ontzilting en concentratie van eiwitten.
We gebruikten een {{0}}.11㎡ 10 kd membraancassette met poriegrootte (G01100010K) om 500 ml PEG-gemodificeerde groeihormoonoplossing te ontzouten en te concentreren in een concentratie van 0,2 mg/ml. Gedurende het hele ultrafiltratieproces werden de ontziltingssnelheid, de eiwitterugwinningssnelheid, de toestand van falen van de membraanflux en de terugwinningssnelheid van de waterflux onderzocht.
Voor en na het gebruik hebben we de waterstroom van de membraancassette afzonderlijk getest en het herstelpercentage van de membraancassettes bereikte 98% onder het uitgangspunt van het handhaven van dezelfde voedingssnelheid, voedingsdruk en refluxdruk.
Het hele proces verwerkte in totaal 2 liter materiaal en duurde 40min, 0-5min was het concentratieproces, 5-35min was het vloeistofuitwisselingsproces en 35-40min was het overconcentratieproces. Gedurende het hele ultrafiltratieproces werd de TMP gestabiliseerd tussen 0,7-0,8 bar, de voedingssnelheid was constant en de gemiddelde materiaalstroom was 27 LMH.
2L materiaal geconcentreerde vloeistofuitwisseling tot 60 ml, ongeveer 33 keer geconcentreerd, ontziltingspercentage bereikt 99%, herstelpercentage bereikt 80%, na een wasbeurt, een toename van 50 ml vloeistof, de totale terugwinning van 88%, industriële productie volgens het dode volume van pijpleidingberekeningen, voor zover mogelijk om het aantal keren van de topwas te verhogen, algemene topwas 3 keer kan volledig worden hersteld.
Membraancassettes van Guidling Technology zijn gemaakt van inerte materialen van medische kwaliteit met een sterke corrosieweerstand en zijn bestand tegen sterke alkalische reiniging; het gebruik van een geautomatiseerd productieproces garandeert de continuïteit en kwaliteitsbetrouwbaarheid van het product, hogere mechanische sterkte, tegendrukweerstand en herhaalde spoelprestaties; het heeft een superhydrofiliciteit, waardoor het membraan een hogere flux en een lagere eiwitadsorptie kan krijgen; we hebben ook een geoptimaliseerd stroomkanaalontwerp met een kleinere drukval, wat de materiaaloverdracht vergemakkelijkt en de filtratietijd aanzienlijk verkort.
Onze membraancassettes zijn verkrijgbaar in een breed scala aan poriegroottes, van 1kd tot 1000kd. Onder hen kunnen 1-10kd ultrafiltratiemembraancassettes worden gebruikt voor ontzilting en pyrogeenverwijdering; Ultrafiltratiemembraancassettes van 30 kD kunnen worden gebruikt voor monoklonale antilichaamconcentratie en buffervervanging; Tegelijkertijd kunnen onze hollevezelproducten ook worden gebruikt voor de concentratie en vervanging van biologische stoffen, met poriegroottes van 100 kd, 300 kd en 500 kd, die voornamelijk worden gebruikt voor een groot aantal toepassingen in vaccinproducten.
Guidling Technology is een nationale hightech onderneming die zich richt op biofarmaceutica, celcultuur, zuivering en concentratie van biogeneeskunde, diagnose en industriële vloeistoffen. We hebben met succes centrifugale filterapparaten, ultrafiltratie- en microfiltratiecassettes, virusfilters, TFF-systemen, dieptefilters, holle vezels, enz. ontwikkeld. Die volledig voldoen aan de toepassingsscenario's van biofarmaceutica, celcultuur, enzovoort. Onze membranen en membraanfilters worden veel toegepast bij het concentreren, extraheren en scheiden van voorfiltratie, microfiltratie, ultrafiltratie en nanofiltratie. Onze vele productlijnen, van kleine laboratoriumfiltratie voor eenmalig gebruik tot productiefiltratiesystemen, steriliteitstesten, fermentatie, celcultuur en meer, voldoen aan de behoeften van testen en productie. Guidling Technology kijkt ernaar uit om met u samen te werken!
