Q Sterke anionmembraanchromatografie

 

2. Productvoordelen

2.1 Snel en efficiënt - bereikt een hoge bindingscapaciteit bij stroomsnelheden die tot 40 keer sneller zijn dan traditionele harsen. Vergeleken met gepakt-bedchromatografie wordt de procestijd bij gebruik van membraanchromatografie 30-40 keer verkort. Het typische bedrijfsdebiet is 10 MV/min.

2.2 Hoge bindingsefficiëntie - membraanchromatografie vertoont een hoge laadcapaciteit en hoge stroomsnelheden onder omstandigheden met een lage drukval, waardoor geladen biomoleculen in één keer kunnen worden opgevangen.

2.3 Schaalbaar en flexibel - De volledige serie membraanchromatografieproducten kan voldoen aan de uiteenlopende behoeften van de zuivering van biomacromoleculen en omvat alle stadia, van procesontwikkeling tot grootschalige productie-. Het structurele ontwerp van het capsule-type ondersteunt zowel eenmalig gebruik- als hergebruik na reiniging.

2.4 Verbeter de productiviteit - Het compacte ontwerp minimaliseert de voetafdruk van de faciliteit. Door het elimineren van kolompakking, reiniging, reinigingsvalidatie en kolomopslagbewerkingen vereist het proces minder buffer voor equilibratie en kan het direct worden uitgevoerd zonder kolomvoorbereiding. De arbeidskosten kunnen tot 50% worden verlaagd.

 

3. Technische parameter

3.1 Structureel materiaal

	Laboratoriumschaal	kleinschalig	pilot schaal	productie schaal
membraanvolume	0,2 ml	5 ml	140 ml	5L
Membraandraagstructuur:	polypropyleen (PP)
membraan behuizing	polypropyleen (PP)
O-ring	siliconen

 

3.2 Bedrijfskarakteristieken

	Laboratoriumschaal	kleinschalig	pilot schaal	productie schaal
membraanvolume	0,2 ml	5 ml	400 ml	5L
Aanbevolen stroomsnelheid	1-6 ml/min	25-150 ml/min	2-12L/min	25-150L/min
Maximale bedrijfstemperatuur	35 graden
Maximale werkdruk	3bar (25 graden)
Maximaal drukverschil	3bar (25 graden)
Bewaaromstandigheden:	20% waterige ethanoloplossing

 

De levensduur van Q-membraanchromatografie is vergelijkbaar met die van agarosegelchromatografie.

 

 

Figuur 1. Veranderingen in de laadcapaciteit van membraanchromatografie na meervoudig gebruik, gevolgd door BSA

Daarnaast evalueerden we de verwijderingsefficiëntie van membraanchromatografie voor gastheerceleiwitten en nucleïnezuren. De resultaten zijn als volgt.

	DNA				HCP
	IgG-herstel	Inhoud (pg/mg IgG) door RT-PCR		Verwijderingsfactor	Inhoud (ng/mg IgG) door Elisa		Verwijderingsfactor
Loop	%	Vóór Q-membraan	Na Q-membraan	Logboek	Vóór Q-membraan	Na Q-membraan	Logboek
1	96.7	423	1.2	2.55	7	4.8	0.16
2	97.4	438	1.3	2.53	7	4.9	0.15
3	94.7	513	1.3	2.60	6	1.9	0.50
4	95	32	0.9	1.55	6	4.2	0.15
5	96.3	45	1.1	1.61	8	5.2	0.19
6	96.5	158	0.7	2.35	8	6.2	0.11
7	96.4	267	1.9	2.15	9	7.2	0.10
8	96.8	298	2.3	2.11	9	8.2	0.04
9	97.1	746	1.5	2.70	4	2	0.30
10	96.6	39	1	1.59	4	1.5	0.43

Tabel 1. Verwijderingspercentages van DNA en gastheerceleiwitten in CHO-tot expressie gebracht IgG-materiaal met behulp van Q-membraanchromatografie

 

Een reeks experimenten toonde aan dat Q-membraanchromatografie effectief onzuiverheden kan verwijderen terwijl de hoge beoogde IgG-terugwinning behouden blijft.

Daarnaast hebben we Gudiling-membraanchromatografie vergeleken met geïmporteerde merken en de gegevens over de laadcapaciteit zijn als volgt:

Ladingscapaciteit (mg/ml)	Sartorius	PAL	Begeleiden
BSA	29	60	45
ZODE	25	40	35
Eiwit A	27	45	40
Trypsine	30	56	44

Tabel 2. Laadprestaties van verschillende eiwitten op ons product en producten van concurrenten

Uit de algemene evaluatie blijkt dat onze laadcapaciteit vergelijkbaar is met geïmporteerde producten,

Figuur 2.Met behulp van een Q-membraanchromatografiemodule werd BSA als het standaardeiwit gebruikt om de bindingscapaciteit te evalueren. Het dynamische bindingsvermogen werd vergeleken met dat van geïmporteerde producten. De resultaten toonden aan dat het grootste deel van het doeleiwit kon worden opgevangen en geëlueerd150 mM NaClbij gebruik van BSA als modeleiwit.

Door verschillende elutieomstandigheden hebben we ontdekt dat het elutiegedrag van membraanchromatografie vergelijkbaar is met dat van agarosegelchromatografie. De zuiverheid van eiwitten die bij verschillende zoutconcentraties worden geëlueerd, varieert aanzienlijk. Bij de daadwerkelijke procesontwikkeling en productie is het noodzakelijk om de optimale elutieomstandigheden kwantitatief te bepalen om het doeleiwit met hoge zuiverheid te verkrijgen.

 

4. Typisch toepassingsgeval

Verwijdering van DNA, virussen, gastheerceleiwitten (HCP) en endotoxinen

Vangst van plasmiden, virussen en eiwitten, evenals zuivering van oligonucleotiden

 

5. Werkwijze

5.1: Voorbereiding en montage van apparatuur:

5.1.1: AKTA-chromatografiesysteem: Installeer de membraanchromatografiemodule op een manier die vergelijkbaar is met gepakte kolommen. Zorg ervoor dat de richting van de pijl op de module consistent is met de richting van de voedingsstroom. Sluit het systeem aan met behulp van Luer-connectoren of Tri-Clamp-fittingen.

5.1.2 Stel het inlaatdebiet in op 5–10 MV/min en gebruik de evenwichtsbuffer om lucht uit het systeem te verwijderen. Nadat u zich ervan heeft verzekerd dat er geen luchtbellen in de uitlaatstroom zitten, sluit u de permeaatuitlaat aan op het chromatografiesysteem.

5.2: Behandeling vóór- gebruik:

5.2.1:

Set the inlet flow rate to 5–10 MV/min and perform pre-treatment with 0.5 M NaOH at >5 MV om ervoor te zorgen dat het membraan een evenwicht bereikt.

5.2.2:

At the same flow rate, perform pre-treatment with 1 M NaCl at >5 MV om ervoor te zorgen dat het membraan een evenwicht bereikt.

5.3 Chromatografieproces

5.3.1 Set the feed flow rate to 5–10 MV/min and perform pre-treatment with equilibration buffer at >5 MV totdat het membraan evenwicht bereikt.

5.3.2 Nadat het monster vooraf- is gefilterd door een filter van 0,22 μm, laadt u het op de kolom totdat het gehele monster is aangebracht of totdat de chromatografische bindingscapaciteit is bereikt.

5.3.3 Flush with equilibration buffer at >10 MV totdat het UV-signaal naar de basislijn daalt.

5.3.4 Voer een gradiënt- of lineaire elutie uit volgens het ontworpen protocol en verzamel indien nodig fracties.

5.4 CIP-behandeling na-gebruik – Membraanchromatografie-apparaat CIP

5.4.1 Set the feed flow rate to 5–10 MV/min and treat with 1 M NaOH at >10 MV totdat het UV-signaal onder de basislijn daalt.

5.4.2 Schakel na 30 minuten circuleren over op wassen met water totdat de pH 7–8 bereikt, schakel vervolgens over op 20% ethanol en ga door met wassen totdat de geleidbaarheid stabiliseert.

5.5, opslag van membraanchromatografie:

Na gebruik en voltooiing van CIP kan de membraanmodule worden gedemonteerd en opgeslagen in 20% ethanol, of online worden bewaard bij kamertemperatuur in 20% ethanol. De ethanoloplossing moet periodiek worden vervangen en geïnspecteerd.

 

6. Bestelinformatie

Q Sterk anion-Exchange Membraanchromatografie Capsulefilter

	Laboratoriumschaal	kleinschalig	pilot schaal	productie schaal
Productmodel	IEXQ0002ES	IEXQ0050ES	IEXQ0400ES	IEXQ5000ES
membraanvolume	0,2 ml	5 ml	400 ml	5L

Populaire tags: q sterke anionmembraanchromatografie, China, leveranciers, fabrikanten, fabriek, groothandel, bulk, op voorraad, gratis monster